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要減輕Elisa試劑盒的基質(zhì)效應(yīng),要懂得這些檢測操作要點(diǎn)

更新時(shí)間:2022-03-26 點(diǎn)擊次數(shù):1190次
  我們在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,有時(shí)會遇到樣品濃度挨近試劑盒的靈敏度就容易發(fā)生樣本OD450值低于空白值的現(xiàn)象,特別是在血清和血漿樣本中。這就有可能是基質(zhì)效應(yīng)導(dǎo)致的結(jié)果。基質(zhì)效應(yīng)可以通過產(chǎn)品研發(fā)階段的優(yōu)化盡可能去去除的。
  ELISA試劑盒在開發(fā)進(jìn)程中,標(biāo)準(zhǔn)品不選用人或動(dòng)物血清、血漿作為標(biāo)準(zhǔn)曲線的稀釋液,只能選用其仿照物。我們量身定制的緩沖液系統(tǒng),這些優(yōu)化后的緩沖液體系能很好去除基質(zhì)效應(yīng)。還有當(dāng)檢測某個(gè)分析物時(shí),其他相關(guān)因子或類似結(jié)構(gòu)因子如果有非特異性結(jié)合,也會導(dǎo)致基質(zhì)效應(yīng),我們也因此做了大量的交叉反應(yīng),確保沒有明顯的交叉反應(yīng)和干擾。
  檢測操作要點(diǎn):
  1、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。一切試劑瓶蓋須蓋緊以避免蒸騰和污染,試劑避免受到微生物的污染,由于蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)過錯(cuò)的成果。
  2、當(dāng)心汲取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)刻和溫度。請注意在汲取標(biāo)本/標(biāo)準(zhǔn)品,孔加樣之間的時(shí)刻距離假如太大,將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育”時(shí)刻,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。而且,洗滌不充分將影響實(shí)驗(yàn)成果。
  3、試劑盒保存:部分試劑保存于-20℃,部分試劑保存于2-8℃,詳細(xì)以標(biāo)簽上的標(biāo)明為準(zhǔn)。
  4、濃洗滌液會有鹽分出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
  5、剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少量水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實(shí)驗(yàn)成果形成任何影響。
  6、中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。
  7、一切的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

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